待細(xì)胞生長(zhǎng)鋪滿(融合度約80-90%),移除培養(yǎng)基。PBS清洗,用0.25%胰蛋白酶消化3-5min。培養(yǎng)基終止,300g x 5 min離心獲得細(xì)胞沉淀。新培養(yǎng)基重懸細(xì)胞沉淀,5000-10000/cm2接種于新的培養(yǎng)器皿中。培養(yǎng)基用量依據(jù)細(xì)胞培養(yǎng)器皿底面積,下表可供參考。
注意:細(xì)胞接種密度可依據(jù)實(shí)驗(yàn)計(jì)劃、不同細(xì)胞類型及供體調(diào)整。